Sulfo-NHS-LC-生物素說明書

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Sulfo-NHS-LC-生物素說明書

目錄號

A8003

apexbt A8003 胺反應性生物素化試劑，長鏈

100毫克

背景

Sulfo-NHS-LC-biotin (Sulfosuccinimidyl 6-(biotinamido) Hexanoate) 是一種胺反應性生物素化劑。作為 NHS-LC-生物素的水溶性類似物，Sulfo-NHS-LC-生物素在 NHS 環結構上含有一個帶負電荷的磺酸基，在分子內產生足夠的極性，使其可以直接加入到水性反應中而無需預先溶解有機溶劑。Sulfo-NHS-LC-生物素通過其 NHS 酯與蛋白質和其他分子中的胺基共價結合，形成酰胺鍵并釋放 N-羥基琥珀酰亞胺。Sulfo-NHS-LC-生物素在共價修飾分子和雙環生物素環之間的長度 (22.4 A) 比 NHS-生物素 (13.5 A) 更長，這為探針提供了更大的機會到達深埋在內部的結合位點蛋白質的表面平面。

參考

生物共軛技術，第 2 版。作者：Greg T.Hermanson（Pierce Biotechnology，Thermo Fisher Scientific，Rockford，IL）。學術出版社（Elsevier 的印記）：倫敦、阿姆斯特丹、伯靈頓、圣地亞哥。2008. 國際標準書號 978-0-12-370501-3。

產品引用

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2.賈J，岳X，等。“KDEL 受體是一種細胞表面受體，通過網格蛋白介導的運輸載體在質膜和高爾基體之間循環。" 細胞分子生命科學。2020；10.1007/s00018-020-03570-3。 PMID:32562023
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特征

• 蛋白質標記— 生物素化抗體，以促進使用鏈霉親和素樹脂或探針進行固定、純化或檢測
• 細胞表面標記 —不穿透質膜，僅對整個細胞的表面蛋白質進行生物素化
• 胺反應性— 與伯胺 (-NH2)反應，例如賴氨酸側鏈，或 N-末端胺
• 可溶性——與普通 NHS 酯化合物相比，帶電荷的磺基-NHS 基團增加試劑水溶性
• 不可逆——形成酰胺鍵；間隔臂不能被切割
• 中等長度——間隔臂為 22.4 埃；在足夠的長度（生物素結合的空間位阻最小）和適中的質量之間提供出色的平衡

化學性質

貯存	-20°C儲存本品在溶液中不穩定，使用前請立即溶解。
重量	556.6
CAS號	127062-22-0
公式	C 20 H 29 N 4 NaO 9 S 2
同義詞	生物素氨基己酸3-磺基-N-羥基琥珀酰亞胺酯鈉鹽
化學名稱	2,5-二氧代-1-[6-[5-(2-氧代-1,3,3a,4,6,6a-六氫噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基]己酰氧基]吡咯烷-3-磺酸；鈉
自衛隊	下載自衛隊
典型的微笑	C1C(C(=O)N(C1=O)OC(=O)CCCCCNC(=O)CCCCC2C3C(CS2)NC(=O)N3)S(=O)(=O)O.[Na]
運輸條件	用藍冰運送，或根據其他要求運送。
一般提示	為獲得更高的溶解度，請將試管加熱至 37°C，并在超聲波浴中搖晃片刻。我們不建議長期儲存溶液，請盡快用完。

協議

生物素化方法[1]：
樣本	心肌細胞
制備方法	溶于水、DMSO 或 DMF。
反應條件	0.5 mg/ml，37oC 2 小時
應用	Sulfo-NHS-LC-生物素以 0.5 mg/ml 的濃度溶解在 PBS 中。然后將其與心肌細胞在 37oC 下孵育 2 小時。之后，將細胞在含有 100 mM 甘氨酸的冷 PBS 中洗滌兩次，并在單獨的冷 PBS 中洗滌兩次，以去除多余的生物素試劑。為了捕獲生物素化的蛋白質，將 100 μl 鏈霉親和素瓊脂糖樹脂與每 100 μg 樣品在 4oC 下孵育 16 小時。使用含有 40 mg/mL 二硫蘇糖醇的 Laemmli 2X 樣品緩沖液在 60oC 下洗脫捕獲的蛋白質 30 分鐘，并使用一抗進行蛋白質印跡分析。