complementtech R137說明書
名稱：因子H蛋白（大鼠）
目錄號：R137
可用規格：100µg/瓶
濃度：1.0 mg/mL（準確濃度見檢驗報告）
形態：液體
純度：> 90%（SDS-PAGE法）
緩沖液：10 mM磷酸鈉，145 mM NaCl，pH 7.3
消光系數A280 nm = 1.682(1.0 mg/mL)
分子量：155000 Da（單鏈）
豁免前：無，0.22µm過濾
儲存：-70 ℃
C或以下。避免凍融。
來源：來自健康動物的正常大鼠血清
預防措施：使用常規預防措施處理動物血液制品。
來源：美國生產。
從正常大鼠血清中純化大鼠（Rattus Norvegicus）補體因子H（fH）。H因子是補體替代途徑的重要調控成分。這對于防止宿主細胞和組織（尤其是腎臟）的補體激活至關重要。它具有兩個功能活性：1）控制替代途徑C3 / C5轉化酶的形成和衰減（衰減加速活性）； 2）作為I因子的輔因子，當C3b與H因子結合時，它通過蛋白水解作用使C3b失活（輔助因子活性）。據報道，C3b結合蛋白類似于從大鼠血漿中分離出的H因子，它是由大鼠血小板產生的，并起著免疫粘附受體的作用，可清除嚙齒動物中的免疫復合物（Alexander JJ等人（2001年））。
一般描述
大鼠（褐家鼠）補體因子H(fH)從正常大鼠血清中純化而來。因子H是補體替代途徑的重要調節成分。它對于預防宿主細胞和組織（尤其是腎臟）上的補體激活至關重要。它具有兩種功能活性：1）控制旁路途徑C3/C5轉化酶的形成和衰變（衰變加速活性），和2）作為因子I的輔因子，當C3b與因子H結合時，其蛋白水解使C3b失活（輔因子活性）。據報道，C3b結合蛋白與從大鼠血漿中分離的因子H相似，由大鼠血小板產生，并作為免疫粘附受體在嚙齒類動物中清除免疫復合物（Alexander J.J. et al.(2001))..(2001)).
因子H是由20個同源結構域組成的155000 Da蛋白，在半柔性串上像微珠一樣排列。N端5個結構域與C3b結合并抑制因子b的結合，從而減少C3/C5轉化酶的形成。因子H還與預形成的C3/C5轉化酶（C3b、Bb和C3b、Bb、C3b）結合，并引起催化亞基Bb的快速釋放（衰變加速）。這些活性對于控制血漿中替代途徑擴增過程的自發激活至關重要。此外，當C3b附著在顆粒表面時，因子H控制這些酶的形成和衰變。對宿主細胞有效，對外來顆粒效果較差，原因如下。補體的替代途徑是通過產生液相C3b樣C3(H2O)和C3b的“蜱”不斷激活。因子H可與這些蛋白結合并作為輔因子，使因子I（一種以活性形式循環的絲氨酸蛋白酶）可裂解其產生無活性蛋白（iC3b或iC3(H2O)）的α鏈。如果C3b不以這種方式失活，它繼續形成C3轉化酶，消耗因子b和C3。如果C3b附著在表面，則通過因子H和i以相似的方式轉化為iC3b。當C3b駐留在宿主細胞上時，由于因子H識別的宿主標記物的存在，因子H更有效。由于因子H識別的宿主特異性識別，補體介導的宿主損傷小化。
因子H似乎通過識別宿主標志物來調節潛在病原體與宿主細胞和組織之間的區分。連接到表面的C3b可以啟動替代途徑的擴增級聯。因子H在宿主細胞上阻止了這一點，并使其發生在不帶有宿主樣標記的表面。這些宿主特異性結構被認為是聚陰離子簇，如唾液酸和硫酸化糖胺聚糖。通過位于因子H結構域6-20的多個多陰離子結合位點識別宿主標志物。一個位點位于結構域7，該結構域的突變(Y402H)與年齡相關性黃斑變性中的補體激活和組織破壞密切相關（Zipfel,P.F. et al.(2006)).一個暫定位點位于結構域12-14區域，一個非常重要的位點位于結構域19-20的C-末端。該C-末端位點似乎是幫助結合宿主表面的主要位點。在遺傳性溶血性尿毒癥綜合征中，影響或位于這些結構域的突變導致補體替代途徑的激活（Zipfel,P.F. et al.(2006)).該位點似乎是參與聚陰離子依賴性二聚體和因子H四聚體形成的位點（Pangburn,M.K. et al.
(2009)).
物理特性和結構據報道，大鼠因子H的分子量約為150,000至155,000道爾頓(Daha MR et al.(1982)；Demberg Tet al.(2002)；Alexander JJ et al.，2001)。大鼠因子H的糖基化水平為9.5%（Demberg Tet al.,(2002)。在非還原和還原條件下通過SDS/聚丙烯酰胺凝膠電泳(Invitrogen)對純化的大鼠因子H（目錄號R137）進行分析，結果顯示有一條條帶略微早于人因子H（155,000道爾頓）遷移。使用ProtParam，根據其氨基酸序列計算大鼠因子H的消光系數(E1%/280 nm = 16.82)，并假設所有Cys殘基對均形成胱氨酸（即一對半胱氨酸分子通過二硫鍵連接）。根據其氨基酸序列計算的pI為6.29。Demberg Tet al.(2002)報告因子H大鼠血清的正常血漿濃度為238 + 21 μg/mL，而Daha MR et al(1982)報告為244 + 21 μg/mL。
功能參見上述一般描述。
分析H因子的功能試驗測量其衰變加速活性或I因子輔因子活性(Morgan,B.P.(2000))。已報告了連續監測的熒光測定法(Pangburn,M.K. et al.(1983))，該方法利用存在C3b時ANS（8-苯胺基-1-萘磺酸）的熒光下降約8倍（當C3b轉化為iC3b時）。因子H的其他功能試驗見人因子H的含量測定章節（目錄號A137）。
使用方便的輔因子測定法（通過SDS凝膠測定純化C3b的裂解）測定純化大鼠因子H（目錄號R137）的輔因子活性。
在存在1µg人因子I（目錄號A138）的情況下，將4 μg(4 μg)大鼠C3b（目錄號R114）與不同量的大鼠因子H（目錄號R137，范圍為0.1至1µg，總體積為12µL）共同孵育。將試驗置于濕冰上，然后在37 ℃下孵育15 min，此時向試管中加入含還原劑的SDS樣品緩沖液，并將樣品加熱5 min。SDS凝膠分析顯示，在 > 0.02 μg大鼠因子H和1 μg人因子I存在的情況下，大鼠C3b的α鏈裂解 > 90%。
功能在上述一般描述章節中描述了因子H的生物學功能。
遺傳學大鼠因子H染色體位置13。大鼠因子H的NCBI基因ID編號為155012，UniProt登錄號為Q91YB6。
預防措施/毒性/危害：該蛋白從動物血漿/血清中提純，因此必須采用適用于處理任何動物血源性產品的預防措施。
危害代碼：B WGK Germany 3MSDS可根據要求提供。
CAS登記號：80295-65-4
